藥物擊靶顯微鏡照片

8月5日，《科學(xué)·進(jìn)展》藥物擊靶”顯微鏡照片。照片顯示：當(dāng)藥物分子(硫黃素T)要期刊發(fā)表我國學(xué)者論文，其上登載了一張“與生命體內(nèi)的靶蛋白結(jié)合、起藥效時，不是像人們想象的單個分子去結(jié)合蛋白，而是自動像“樂高積木”一樣組裝后，合力“擊靶”，這種“機(jī)靈勁兒”與之前人們的想象完全不同。

本以為它只身赴命，沒想到它兩兩成對、湊四成團(tuán)、甚至6人成伍……

這個新發(fā)現(xiàn)可能帶來哪些顛覆性改變?為什么之前沒拍到過這樣的照片?藥物分子又靠什么像“樂高”一樣自動組裝?帶著這些問題，8月12日，科技日報記者專訪了論文通訊作者之一的中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所副研究員王晨軒。

首張顯微鏡照片究竟能看到什么?

俗話說：外行看熱鬧，內(nèi)行看門道。

一張照片能傳遞哪些信息?全靠怎么看。

“教科書中有一個經(jīng)典的‘鎖鑰模型’，是說藥物分子能夠‘擊靶’必須要和蛋白嚴(yán)絲合縫，像一把鑰匙開一把鎖，但現(xiàn)在的顯微鏡觀測結(jié)果表明，藥物分子用寡聚態(tài)的方式‘工作’，或許我們只需要半個鑰匙就能開鎖。”王晨軒對科技日報介紹，這是科學(xué)家首次直觀看到“藥物擊靶”的狀態(tài)，可用于指導(dǎo)藥物分子的設(shè)計。

研究團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)藥物(硫黃素T)在受體蛋白表面上的結(jié)合結(jié)構(gòu)以寡聚態(tài)存在研究團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)藥物(硫黃素T)在受體蛋白表面上的結(jié)合結(jié)構(gòu)以寡聚態(tài)存在

先說這張照片的主角。它們是藥物分子硫黃素T，和它的靶點(diǎn)分子——胰淀素蛋白(淀粉樣蛋白的一種)。

為什么選擇這兩個主角做研究?王晨軒說，作為生命大分子，蛋白質(zhì)一旦出錯經(jīng)常會“纏繞”錯亂，從正確的折疊構(gòu)象向錯誤的折疊構(gòu)象轉(zhuǎn)變，最后形成淀粉樣的沉淀，因此淀粉樣蛋白和很多疾病相關(guān)。

人們最耳熟能詳?shù)牡矸蹣拥鞍资?beta;-淀粉樣蛋白，它被發(fā)現(xiàn)在老年癡呆癥患者的神經(jīng)細(xì)胞中頻繁出現(xiàn)，很多藥企花巨資想研究怎么讓這些淀粉樣沉淀消失，至今都沒有成功。

還有二型糖尿病、亨廷頓舞蹈癥等等，這些疾病中都有淀粉樣蛋白的身影。因此研究它們與藥物分子的作用機(jī)理對很多疾病有幫助。

硫黃素T正是能和這些“病態(tài)”淀粉樣蛋白特異性結(jié)合的分子，而且它還有顯色的優(yōu)勢。

這對照片上的主角，實(shí)際上背后關(guān)聯(lián)的是很多現(xiàn)在沒有解決辦法的疾病。

照片中的主角干啥了?

硫黃素T兩兩成對、湊四成團(tuán)、甚至6人成伍。用學(xué)術(shù)的說法是：研究團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)硫黃素T在受體蛋白表面上的結(jié)合結(jié)構(gòu)以四種寡聚態(tài)存在，即二聚體(頭尾相接)、二聚體(肩并肩相接)、四聚體、六聚體。

看到這樣一幕為啥要激動?這就是藥物分子能像“樂高”積木自動組裝拼接的最好證據(jù)!

沒看到之前，人們要么認(rèn)為藥物分子只能“單著”，要么靠“盲算”揣測它們的結(jié)合，但是壓根沒證據(jù)，也就更無法指導(dǎo)實(shí)踐了。而之后，藥物設(shè)計者，可以大膽地將選擇性寡聚效應(yīng)應(yīng)用于藥物分子的結(jié)構(gòu)設(shè)計與優(yōu)化中，通過理解藥物的寡聚化機(jī)理并操縱寡聚結(jié)構(gòu)，以藥物團(tuán)簇而不是藥物單分子為“單元”靶向受體蛋白。

顯微鏡照怎么拍出來的?

面對首張“藥物擊靶”顯微鏡照，很多人會問：為什么以前拍不出來?

答：設(shè)備和方法達(dá)不到要求。

蛋白質(zhì)的照片拍攝困難，先是晶體衍射法，再是冷凍電鏡的方法，但是至今仍不是所有的蛋白都能拍攝成功。原因是都必須要讓蛋白排列成有序的陣列，才能滿足成像要求。

“這就好比，只有閱兵式上的解放軍方陣才能成像，而后面的群眾大聯(lián)歡方陣是拍不上的。”王晨軒打了個特別形象的比方，因此要拍攝和藥物分子結(jié)合的蛋白分子，就要用新的拍攝設(shè)備。

掃描隧道顯微鏡勇?lián)厝巍?ldquo;它最初是物理學(xué)家用來探測原子、亞原子的微觀結(jié)構(gòu)，具有超高的分辨能力。”王晨軒說，把物理設(shè)備引進(jìn)生物領(lǐng)域是上世紀(jì)90年代的事情，需要完成對設(shè)備的硬件、軟件、算法的全新研制，中國團(tuán)隊在國際上是較早進(jìn)入這一領(lǐng)域的。

由于它是利用量子力學(xué)中的隧穿效應(yīng)，通過記錄穿越樣品的電子直接捕捉蛋白質(zhì)和藥物分子的“模樣”。最開始的掃描隧道顯微鏡操作必須在真空中。

中國科學(xué)家團(tuán)隊很早解決了常態(tài)下用掃描隧道顯微鏡觀測的問題，在世界上首次使用了掃描隧道顯微鏡，實(shí)現(xiàn)了在大氣室溫下對化學(xué)分子的觀察。

“國內(nèi)學(xué)者經(jīng)過幾代人的不斷傳承，持續(xù)改造設(shè)備、開發(fā)新的數(shù)據(jù)采集方法，我們才充分展示它的能力。”王晨軒說。

為了拍攝首張“藥物擊靶”顯微鏡照，醫(yī)科院基礎(chǔ)所王晨軒、于蘭蘭、張文博，與國家納米科學(xué)中心的王琛、楊延蓮、方巧君團(tuán)隊等幾代科研人打磨多年，不僅發(fā)明了蛋白質(zhì)對基底的吸附技術(shù)、分子伴侶的固定技術(shù)、掃描探針的脈沖技術(shù)等一系列專利技術(shù)，還對整個“拍照”的流程進(jìn)行優(yōu)化和摸索。

“整套(拍照)技術(shù)非常復(fù)雜，很難形成照搬流程，只能像是匠人之間的口口相傳，需要知識、經(jīng)驗(yàn)和揣摩，專業(yè)人員可能需要一年或者幾年的訓(xùn)練時間跟著走下來，才能系統(tǒng)掌握。”王晨軒說。

俗話說，“臺上一分鐘，臺下十年功”。首張“藥物擊靶”顯微鏡照不僅凝結(jié)了幾代人對這一領(lǐng)域的積累，而且是一個集結(jié)了生物、物理、成像等多學(xué)科人才的團(tuán)隊多年創(chuàng)新的呈現(xiàn)。

臨床價值逐漸顯現(xiàn)：藥物合成或指數(shù)級簡化

看到了藥物分子會“玩樂高”，對現(xiàn)實(shí)有什么意義嗎?

答：能簡化藥物合成路徑。“藥物設(shè)計是個‘配鑰匙’的過程。人們已知一個疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，想設(shè)計一種反向性的藥物，需要有機(jī)化學(xué)家、計算機(jī)輔助藥物設(shè)計的理論化學(xué)家等一起構(gòu)筑一個和蛋白質(zhì)活性中心匹配的足夠大的鑰匙才能工作。”王晨軒對科技日報解釋，藥物合成越長越難，每個基團(tuán)像“粘胳膊”一樣，到了產(chǎn)業(yè)化的時候?qū)に嚨囊蟾侵笖?shù)級的增加。如果藥物其實(shí)只需要合成原來的很小一段，1/4或者是1/8，那么難度將大大降低。

在生產(chǎn)一頭，藥物合成指數(shù)級簡化;在進(jìn)入身體里發(fā)揮功效時，也會事半功倍。

“小分子到體內(nèi)，能夠穿過一些大分子過不去的屏障。”王晨軒介紹，比如一個抗腫瘤的藥物，要進(jìn)入實(shí)體瘤是很困難的。因?yàn)閷?shí)體瘤內(nèi)部高度液化，壓強(qiáng)非常大，大分子根本無法抵達(dá)，但小分子就不一樣了，能夠自由擴(kuò)散，直接到達(dá)作用位點(diǎn)，組裝后再起作用，將起到更好的療效。

“我們清楚地在顯微鏡中觀察到藥物分子的4種寡聚態(tài)，這提示我們藥物設(shè)計時應(yīng)考量藥物團(tuán)簇是發(fā)揮作用的基本單元。”王晨軒說，所以藥物設(shè)計應(yīng)該把分子之間的作用考慮進(jìn)去。

具體到實(shí)際工作中，王晨軒認(rèn)為還有很多理論需要完善。例如，進(jìn)一步地研究可以對老藥物進(jìn)行排查，根據(jù)以往的藥物數(shù)據(jù)，來證明它和蛋白質(zhì)相互作用的方法，是以哪種有序結(jié)構(gòu)存在的。

“我們同時需要明確藥物分子結(jié)合所需的能量，就可以通過能量來控制分子是以二聚態(tài)形式還是其它寡聚態(tài)形式存在了。”王晨軒說，其中還涉及到很多物理化學(xué)領(lǐng)域的理論予以支持。

要大大簡化現(xiàn)有的藥物設(shè)計程序還有很長的路要走。王晨軒說，這張顯微鏡照片證明了這個路徑的可行性。團(tuán)隊的研究提供了一個工具、一套理論的基礎(chǔ)，但具體如何實(shí)現(xiàn)，如何在此基礎(chǔ)上理論聯(lián)系實(shí)際，真正運(yùn)用到臨床藥物的研發(fā)中，還需要很多工作的開展。

建筑學(xué)有LESS IS MORE(少即是多、簡單就是美)的理念。首張“藥物擊靶”顯微鏡照告訴我們，這個理念對于藥物設(shè)計或許同樣適用